主线BOSS的挑战顺序直接影响游戏进程的推进和剧情解锁。主线BOSS包括恶兆、满月女王、初王魂、雪山巨人、黑剑、初代艾尔登王以及最终BOSS黄金律法拉达冈与艾尔登之兽。这些BOSS的击败是解锁新区域和结局的必要条件，而支线BOSS如碎星、女武神等则提供额外剧情和装备奖励，但非主线必需。主线任务的核心目标是收集大卢恩并修复艾尔登法环，最终成为艾尔登之王。
主线BOSS的挑战需遵循一定顺序，否则部分区域将无法进入。击败恶兆和满月女王后，王城结界才会解锁，允许玩家进入罗德尔。雪山巨人战是剧情关键节点，击败后触发烧树事件，推进至天空城。黑剑的击败会导致王城崩塌并转为灰烬形态，需返回挑战最终BOSS。主线流程中，玩家需注意部分BOSS战会强制触发剧情变化，例如击败火焰巨人后梅琳娜会牺牲，影响后续支线任务的完成。
主线BOSS的难度差异较大，建议根据推荐等级逐步挑战。恶兆作为早期BOSS，攻击模式较为固定，但高伤害需谨慎应对。满月女王战分为两阶段，第一阶段需清理分身，第二阶段注意魔法弹幕躲避。雪山巨人和黑剑属于高攻高防类型，需利用场地掩体或召唤骨灰分担压力。最终战拉达冈与艾尔登之兽连续进行，前者近战压制，后者远程范围攻击，需灵活切换战术。
装备与等级对主线BOSS战至关重要。前期可优先强化武器至+15并搭配抗性护符应对特定BOSS。黑剑的圣属性伤害可通过圣抗性护符减轻，火焰巨人的火抗装备能显著提升生存率。魔法与祷告玩家需注意BOSS的属性弱点，如艾尔登之兽对圣属性抗性极高，需改用物理或其他属性输出。
